Imūnhistoķīmiskā (IHC) antiviela ir reaģents, ko parasti izmanto zinātniskos pētījumos, lai atzīmētu interesējošos antigēnus. Antigēns ir jebkura maza molekula, kas var izraisīt imūnreakciju, kas liek ražot antivielas pret konkrēto antigēnu. Pamatojoties uz zīdītāju imūnsistēmu, antivielu veidošanās ir viens solis procesā, kurā materiāls tiek identificēts kā svešs, lai organisms pēc tam varētu uzbrukt invazīvai vielai un to izraidīt neatkarīgi no tā, vai tas ir vīruss, bakteriāla infekcija vai neliela molekula, piemēram, ziedputekšņi.
Antivielām var būt milzīga specifika un saistīšanās spēja antigēnu marķēšanā. Šī specifika tiek izmantota zinātnieku labā, kad antivielu ražošana ir vērsta uz specifisku interesējošo antigēnu identificēšanu. Plānu audu daļu var iekrāsot ar antivielu, lai eksperimentētājs varētu viegli identificēt visas šajā paraugā esošās antigēna vietas. Daudzi uzņēmumi specializējas antivielu radīšanā, tāpēc zinātniekiem un eksperimentētājiem ir pieejams plašs kolektīvais antivielu katalogs.
IHC antivielu izmanto dažādās eksperimentālās tehnikās. Bieži tiek izmantota antivielu krāsošana plānās audu daļās, kas iestrādātas parafīnā vai plastmasā, lai antigēnus varētu atrast in situ. IHC antivielu var izmantot arī eksperimentālās izgulsnēšanas paņēmienos, piemēram, līdzimunoprecipitācijas testā, koncentrējoties uz antigēnu izņemšanu no šķīduma, lai kvantitatīvi noteiktu antigēna daudzumu, kas atrodas lielā audu gabalā. Testus, kas mēra gaismas daudzumu, kas spēj labi iziet cauri audu kultūras plāksnei pēc tam, kad supernatants ir pakļauts iepriekš labi pārklātas IHC antivielas apakšai, bieži izmanto arī, lai kvantitatīvi noteiktu antigēna daudzumu homogenizētā viela. audu paraugs.
Ir iespējams izmantot antivielu krāsošanas protokolus, kas balstās uz vienas antivielas izmantošanu antigēna noteikšanai. Šos protokolus parasti izmanto audu paraugiem, kas ir iegulti nereaģējošā substrātā un uzstādīti uz stikla priekšmetstikliņa. Šīs vienas antivielas krāsošanas procedūras ir populāras arī laboratorijās, kas marķē savas antivielas ar noteikšanas molekulām, piemēram, fluoroforiem.
Tomēr biežāk antivielu krāsošanas protokolos ir jāizmanto primārās un sekundārās antivielas. Primārā IHC antiviela tiek radīta pret specifisku antigēnu, kas var būt retāk pētīts. Sekundārā IHC antiviela tiks paaugstināta pret primāro IHC antivielu. Tomēr sekundārā antiviela tiks marķēta ar identificējošu molekulu, piemēram, biotīnu vai fluoroforu. Šī divu antivielu metode ir izplatīta, jo uzņēmumi ietaupa naudu, pievienojot fluoroforus vai dārgus marķēšanas reaģentus lielam antivielu daudzumam, kas radīts pret noteiktas sugas imūno marķieriem, nevis marķējot dārgus reaģentus pret antivielām, kas radītas pret antigēnu, ko varētu pētīt ļoti maz cilvēku. zinātnieki.