Kas ir kopējā RNS izolācija?

Kopējā ribonukleīnskābes (RNS) izolācija ir laboratorijas metode, ko izmanto, lai no audu parauga iegūtu visu šūnu RNS. Tas atšķiras no citām apstrādes metodēm, kas selektīvi izvelk noteiktus RNS veidus. Pētnieks, piemēram, varētu vēlēties pārbaudīt ziņojuma RNS (mRNS) un strādāt ar paraugu, lai iegūtu tikai šo ģenētisko materiālu. Ir pieejami vairāki laboratorijas protokoli pilnīgai RNS izolēšanai, izmantojot dažādus zinātnisko piegādātāju ražotus produktus.

Visas šūnu RNS savākšanai no audu parauga var būt vairākas priekšrocības. Tas var sniegt tīrāku un izmantojamāku informāciju. Šī metode var arī ļaut pētniekiem pārbaudīt degradāciju, kas varētu radīt problēmas ar eksperimentiem. Ja paraugs ir sliktas kvalitātes, pētnieks var atkārtoti iegūt RNS, lai iegūtu tīrāku un noderīgāku RNS kolekciju. Tas var būt svarīgi daudzu veidu pētījumiem, kur slikta RNS sākumā rada problēmas ar eksperimentiem.

Pilnīgas RNS izolācijas metodes var ietvert dažādus ķīmiskos aģentus. Daži koncentrējas uz netoksisku ķīmisku vielu izmantošanu, lai samazinātu parauga bojājumu risku. Šādas ķīmiskās vielas arī ierobežo RNS pakārtoto piesārņojumu un ir drošākas laboratorijas darbiniekiem. Laboratorijas mēdz izvēlēties konkrētu ķīmisku vielu un protokolu, ko ieteikt visam personālam, un savās rokasgrāmatās iekļauj detalizētu RNS izolācijas procedūras aprakstu. Tas nodrošina konsekvenci RNS apstrādē objektā, lai iegūtu stabilākus un noderīgākus rezultātus.

Process sākas ar audu parauga sagatavošanu, kura izmērs var būt dažāds, lai sagatavotu to apstrādei, ar kādiem ķīmiskajiem reaģentiem izvilkt kopējo RNS. Tehniķi iepazīstas ar laboratorijas rokasgrāmatu, lai noteiktu, kā rīkoties ar paraugu un apstrādāt to, lai izolētu RNS. Viņi var izmantot tādus rīkus kā elektroforēzes plāksnes, lai pārbaudītu parauga kvalitāti, meklējot degradācijas pazīmes, kas varētu norādīt uz problēmu kopējā RNS izolācijas procesā.

Pētnieki var veikt paši savu kopējo RNS izolāciju vai deleģēt šo uzdevumu laboratorijas asistentam, absolventam vai līdzīgam laboratorijas darbiniekam. Ir iespējams arī noslēgt līgumu par izolāciju uz citām laboratorijas iekārtām. Dažreiz tas var būt nepieciešams, lai aizsargātu eksperimenta integritāti, izmantojot trešās puses pakalpojumus, lai iegūtu pārbaudāmus un atkārtojamus rezultātus. Visos zinātniskajos rakstos, kuru pamatā ir pētījumi ar izolētu RNS, pētniekam ir jāapspriež izolācijas metode un tas, kurš veica darbu.