Pūcēm ir svarīga loma daudzu pasaules kultūru mitoloģijā. Mitoloģijā tie var būt dievu pavadoņi, ļaunie gari, gudri novērotāji vai dabas spēku iemiesojums. Daudzās kultūrās pūces ir nāves vēstneši vai kā citādi saistītas ar pazemes spēkiem. Šī negatīvā pieskaņa man rodas no fakta, ka pūces ir nakts dzīvnieki; Dzīvniekiem, kas ir aktīvi naktī, mītos un folklorā bieži ir negatīva loma.
Slavenākās pūces mitoloģijā, iespējams, ir tās, kas saistītas ar Atēnu, grieķu gudrības un kara dievieti, Atēnu pilsētas patrones dievību. Mākslinieki attēloja Atēnu ar pūci uz viena pleca. Pūces, iespējams, ir bijušas saistītas ar dievieti, jo tās spēja labi redzēt naktī un to lielās acis, kas izraisīja viņas epitetu “spilgto acu Atēna”. Šīs asociācijas rezultātā pūces joprojām ir gudrības simboli Rietumu pasaulē. Viena pūču ģints saglabā nosaukumu “Atēna”.
Citu pasaules daļu mitoloģija pūcēm bieži piešķir draudīgāku lomu. Lai gan romieši pārņēma daudzus grieķu reliģijas elementus, romiešu folklorā bija arī bīstamas pūces līdzīgas radības, kas varēja izsūkt zīdaiņa dzīvības spēku. Līdzīgi arābu mitoloģijā pūces bija sliktas zīmes putni. Leģenda vēstīja, ka pūces gaudo virs nogalināto vīriešu kapiem, un tika uzskatīts, ka viņu olām piemīt pārdabiskas īpašības. Ir zināms, ka līdzīgi uzskati pastāv vai ir bijuši Subsahāras Āfrikā, kur pūces spēlē nāves vēstnešu vai nelaimes nesēju lomu.
Dienvidamerikā un Centrālamerikā pūces atkal ir saistītas ar nāvi un pazemi. Maiju mitoloģijā Ksibalbu, “baiļu vietu”, pārvalda divi nāves dievi – Hun-Came (“Viena nāve”) un Vucub-Came (“Septiņas nāves”). Viņu sūtņi ir četri gari, kas iegūst pūces formu. Tāpat acteku dievs Miktlantekuhtli, mirušo dievs, parādās kā skelets, kas valkā pūces spalvu galvassegu.
Ziemeļamerikas indiāņu tautām savā mitoloģijā bija daudz dažādu pūču lomu. Dažās kultūrās pūce spēlēja pazemes vēstneša lomu, savukārt citās, piemēram, siu, tā bija aizbildne, kas aizsargāja ieeju pēcnāves dzīvē. Passamaquoddy tauta stāstīja stāstu, kurā putns bija izpalīdzīgs gars, kas sagādāja cilvēkiem maģiskas dāvanas.