Kas ir antivielu krāsošana?

Antivielu krāsošana ir laboratorijas procedūra, ko izmanto, lai krāsotu paraugu, lai noteiktu noteiktu antigēnu klātbūtni paraugā vai izceltu antigēnus, lai tos varētu skaidri redzēt. Atkarībā no parauga un tehniķa izvēles var izmantot vairākas dažādas antivielu krāsošanas procedūras. Šo metodi daudzos reģionos māca koledžas un universitātes līmenī, un vidusskolās ar progresīvām zinātnes programmām studenti var apgūt arī antivielu krāsošanu.

Krāsojot antivielas, paraugā ievada antivielu, piemēram, nokasot vai biopsiju. Ja paraugā ir antigēni, uz kuriem antiviela reaģēs, tā nofiksējas uz tiem. Kad paraugs tiek mazgāts, antivielu pārpalikums tiks nomazgāts, atstājot aiz parauga bloķētās antivielas. Ja pētnieks izmanto konjugētas antivielas ar pievienotām fluorescējošām iezīmēm, paraugs iedegsies atbilstošā apgaismojumā, norādot uz attiecīgo antivielu klātbūtni.

Citos gadījumos cilvēkiem ir jāizmanto sekundāra antiviela. Pēc parauga mazgāšanas viņi pievieno sekundāro antivielu, preparātu ar pievienotu fluorescējošu marķējumu. Sekundārā antiviela pievienojas primārajām antivielām paraugā un fluorescēs gaismā, kā aprakstīts iepriekš. Fluorescenci var izmantot slimību diagnostikā, laboratorijas tehniķiem pārbaudot paraugus, lai noteiktu ar konkrētām slimībām saistītus antigēnus, kā arī to var izmantot, lai meklētu piesārņojuma pazīmes un noteiktu antigēnu klātbūtni citu iemeslu dēļ.

Mikroskopijā antivielu krāsošana dažkārt var būt noderīga, lai izceltu noteiktas struktūras. Pat ar izcilu izšķirtspēju mikroskopiju dažkārt var būt grūti aplūkot, un var būt grūti izcelt attēlā paslēptas vai nelielas struktūras. Izmantojot antivielu krāsošanu, cilvēki var izveidot karodziņu, lai viegli identificētu un iezīmētu interesējošās struktūras, piemēram, noteiktus audu veidus vai struktūras šūnās. Fluorescence būs redzama visās priekšmetstikliņa vietās, kur atrodas interesējošā antiviela, kartējot struktūras paraugā.

Antivielu krāsošanai ir nepieciešama piekļuve laboratorijas aprīkojumam, antivielām un dažādiem šķīdumiem, ko izmanto paraugu fiksēšanas un konservēšanas procesā. Ir svarīgi pareizi veikt procedūru, lai izvairītos no piesārņojuma un kļūdām, piemēram, ļaut šķīdumiem pārāk ilgi atrasties uz parauga, aizēnot vai sajaukt rezultātus. Daudzām laboratorijām ir rokasgrāmata, kuru darbinieki ievēro, un, sagatavojot materiālus pētījumiem, cilvēki sīki apraksta savas metodes, lai viņu darbu varētu atkārtot.