Kas ir antivielu noteikšana?

Antivielu noteikšana ir svarīga medicīnā, lai noteiktu slimības, jo antivielas ir lielas olbaltumvielas, kas var atklāt vīrusus un baktērijas. Antivielu noteikšanu veic laboratorijās un uz vietas, lai pārbaudītu antivielu un antigēnu saites un identificētu antivielu pēc tās īpašās krāsas maiņas, kad ar enzīmu reaģējoša substrāta molekula ir saistīta ar to, kamēr tā joprojām ir saistīta ar antigēnu. Noteikšanas tests ir pazīstams kā ar enzīmu saistīts imūnsorbcijas tests (ELISA). Pirms ELISA izstrādes vienīgie testi bija radioimūntesti, kas 1960. gados identificēja antivielas pēc to specifiskās radioaktivitātes. 1970. gadu sākumā tika izstrādātas vairākas ELISA metodes specifisku antivielu identificēšanai.

Antivielu noteikšanas Indirect Sandwich ELISA tehnika sagatavo buferētu šķīdumu, kas satur slimības antigēnu, un saista to ar plastmasas plāksni. Pēc tam tiek ievadīta primārā pacienta antiviela, kas saistās ar antigēnu. Pēc tam ievada sekundāro antivielu ar pievienotu enzīmu un pievieno fermenta substrātu. Tas izraisa reakciju, kas maina fermenta krāsu, norādot, ka abas antivielas ir saistītas, ja pacienta antiviela ir pozitīva pret šo slimības antigēnu. Krāsu maiņas stiprums apzīmē antivielas konstatētās slimības apjomu; šo krāsas stiprumu pēc tam kvantitatīvi mēra ar spektrometru.

Vēl viena ELISA metode, kas ir piemērota, ja pacientu paraugi ir neapstrādāti vai netīri, ir konkurējošā ELISA, kad ar pacienta antigēna paraugu inkubē nemarķētu antivielu. Saistītās antivielas/antigēna komplekss tiek mazgāts tā, lai nesaistītā antiviela tiktu noņemta, un tiek ievadīta sekundārā antiviela, kas savienota ar enzīmu, kas ir specifisks primārajai antivielai, lai saistīties ar antigēnu. Ja fermentam tiek pievienots substrāts, ja slimību konstatē antiviela, ferments kā signālu radīs hromogēnas vai fluorescējošas īpašības. Izraēlas ārstu izmantotajā lauka pārbaudē tiek izmantota mēģene, kas pilna ar olbaltumvielu fragmentiem un antivielām, un tiek ievadīts zils šķidrums. Ja zilais šķidrums desmit minūšu laikā kļūst sarkans, konkrēto antigēnu mēģenē atpazīst šīs slimības antiviela.

Grūti sasniedzamos jaunattīstības valstu apgabalos laboratorijas nav viegli pieejamas. Daudzi komerciāli antivielu noteikšanas komplekti ir pārdoti veselības aprūpes speciālistiem, lai pārbaudītu tuberkulozi, jo īpaši ar bērnu un cilvēka imūndeficīta vīrusu/autoimūna deficīta sindromu (HIV/AIDS) saistītu tuberkulozi. Viens pētījums, kurā bija iekļauti 68 īpaši pētījumi, atklāja, ka šie komplekti nebija tik uzticami kā krēpu uztriepes mikroskopija.

Malārija ir vēl viena slimība, kuras gadījumā antivielu noteikšanai izmanto fluorescējošu antivielu testa procedūru. Šī procedūra ir piemērota asins donoru skrīningam, jo ​​pārliešanas izraisīta malārija var neparādīties vienkāršā asins plēves pārbaudē. Ja pacientam atkārtoti tiek parādīti negatīvi asins paraugi, tomēr viņam ir izteikti slimības simptomi, fluorescējošā marķiera tests to var atklāt. Pārbaudot mikroskopā, malārijas antivielas bieži uzrāda ābolu zaļu krāsu, kas ir pozitīva malārijas parazītam.