Kas ir seruma ELISA?

Seruma enzīmu saistītā imūnsorbcijas pārbaude (seruma ELISA) ir metode, ko izmanto, lai noteiktu bioloģiskās vielas daudzumu seruma paraugā, pamatojoties uz specifisko mijiedarbību starp antigēnu un antivielu. Interesējošo bioloģisko vielu piemēri ir antivielas, kas ražotas, reaģējot uz vīrusu infekciju, piemēram, antiviela pret cilvēka imūndeficīta vīrusu (HIV) vai hormons, kas norāda uz grūtniecību, piemēram, cilvēka horiona gonadotropīns (hCG), vai pret autoimūnu. antivielas, kas ražotas reimatoīdā artrīta gadījumā, piemēram, reimatoīdais faktors. Parasti ir tiešs tests, kurā izmanto specifisku antivielu, lai noteiktu antigēna klātbūtni seruma paraugā, un netiešais tests, kurā izmanto antigēnu, lai noteiktu antivielu klātbūtni seruma paraugā.

Tiešā seruma ELISA testā paraugu, kas satur nezināmu daudzumu antigēna, pievieno nekustīgai virsmai, piemēram, reakcijas mēģenei vai mikrotitrēšanas plāksnei, un inkubē ar specifisku antivielu, kas ir ķīmiski saistīta ar fermentu. Un otrādi, netiešajā seruma ELISA testā zināms antigēns tiek piestiprināts pie nekustīgas virsmas un pēc tam tiek inkubēts ar seruma paraugu, kas satur nezināmu daudzumu antivielu. Paredzams, ka seruma paraugā esošā antigēna specifiskā antiviela cieši saistās ar imobilizēto antigēnu, savukārt nespecifiskās antivielas tiek noņemtas turpmākajos mazgāšanas posmos. Parasti nekustīgo virsmu apstrādā ar otru antivielu, kas atpazīst visu antivielu nemainīgo reģionu un ir ķīmiski saistīta ar fermentu. Gan tiešajā, gan netiešajā ELISA testā pēdējais solis sastāv no fermentam specifiska substrāta pievienošanas, uzsākot reakciju, kas rada izmērāmu signālu, kas ir tieši proporcionāls seruma paraugā esošā antigēna vai antivielas daudzumam.

Seruma ELISA tests ir plaši izmantots tests vairāku iemeslu dēļ. Vissvarīgākais ir tas, ka tas tiek uzskatīts par uzticamu klīnisku testu antigēna un antivielu mijiedarbības specifikas dēļ, un šī testa jutīgums ļauj noteikt bioloģiskās vielas ārkārtīgi zemās seruma koncentrācijās. Tas ir paredzēts liela skaita paraugu novērtēšanai vienlaikus, un tāpēc to bieži izmanto liela mēroga operācijās, piemēram, asins donoru paraugu skrīningam, lai noteiktu HIV antivielu klātbūtni. Turklāt ELISA komplekti, kas mēra parasti pārbaudītās antivielas un antigēnus, ir komerciāli pieejami lietošanai klīniskos vai pētnieciskos apstākļos, un tajos ērti ir visi nepieciešamie reaģenti pilna eksperimenta veikšanai.

Arvien lielāka pētījumu joma ietver seruma ELISA tehnoloģijas izmantošanu citokīnu noteikšanas jomā. Citokīni ir imūnsistēmas izdalītās šķīstošās olbaltumvielu molekulas, kas bieži ir iesaistītas iekaisuma procesos; Tāpēc citokīnu līmenis ir informatīvs par slimības stāvokļiem, kas saistīti ar hronisku iekaisumu, piemēram, sirds slimībām, autoimūnām slimībām un gremošanas slimībām. Tiek uzskatīts, ka citokīnu līmeņa novērtējums var atšķirt iekaisīgas zarnu slimības, piemēram, Krona slimību un čūlaino kolītu, un galu galā var paredzēt sirds slimību un reimatoīdā artrīta iznākumu.