Kas ir ELISA procedūra?

Lai veiktu ELISA testu, ir nepieciešams paraugs, piemēram, asinis. Izplatīts iemesls ELISA analīzei ir infekcijas izraisītāja iedarbības pārbaude, un tādā gadījumā attiecīgajā paraugā var būt vai var nebūt noteikts proteīns, un testu veic, lai meklētu šo proteīnu. Testu var izmantot arī, lai pārbaudītu proteīna koncentrāciju.

Lai veiktu testu, bieži izmanto ierīci, ko sauc par mikrotitrēšanas plāksni. Medicīnisko un kriminālo drāmu cienītāji droši vien ir pazīstami ar mikrotitrēšanas plāksnēm; tie izskatās kā mazas paplātes ar vairākiem ieliktņiem, no kuriem katrā ir flakons. Sviestmaižu ELISA procedūrā tehniķis vispirms pārklāj flakonus ar zināmu antigēnu zināmā koncentrācijā un pēc tam mazgā tos ar buferšķīdumu. Pēc tam pievieno serumu, kas izgatavots no pacienta parauga, kas mazgāts tajā pašā buferšķīdumā.

Ja pacientam antivielas pret antigēniem jau ir mēģenēs, tās pielīp pie stobriņu malām. Nākamais ELISA procedūras solis ietver tā paša antigēna ievadīšanu mēģenēs ar fermentu. Antigēns nofiksējas pie antivielām, kas ir pielipušas pie mēģenes sāniem. Enzīms fluorescē vai maina krāsu, ļaujot tehniķim redzēt, ka serumā ir antivielas, kas bloķējas pret antigēniem, un noteikt koncentrāciju, pamatojoties uz fermenta reakcijas intensitāti.

ELISA procedūra ir ļoti jutīga un ārkārtīgi precīza, jo tehniķi izmanto ļoti specifiskus antigēnus, lai pārliecinātos, ka viņi identificē pareizās antivielas, vai otrādi, atkarībā no tā, kāda veida tests tiek veikts. Tomēr notiek kļūdaini pozitīvi rezultāti. Viltus pozitīva rezultāta piemērā ELISA testu parasti izmanto, lai pārbaudītu HIV iedarbības pazīmes, un dažkārt tiek iegūts viltus pozitīvs rezultāts, jo šķīdums var saistīties ar proteīnu, kas saistīts ar HIV, kas dažiem cilvēkiem ir bez inficēšanās. Tāpēc pozitīvs ir jāapstiprina ar Western Blot.