Kādi ir ELISA procedūras posmi?

Ar enzīmu saistīto imūnsorbcijas testu (ELISA), ko dēvē arī par enzīmu imūntestu (EIA), izmanto kā diagnostikas testu. Tas ir vislabāk pazīstams kā HIV diagnostikas tests. Testa plāksne parasti sastāv no 96 mazām iedobēm, kurās tiek imobilizēts konkrēts antigēns. Ja antiviela ir seruma paraugā, tā saistās ar antigēnu, ļaujot noteikt, izmantojot dažādus ELISA procedūras posmus.

Pirmais solis ELISA procedūrā ir parauga iegūšana no pacienta. To veic medmāsa sterilos apstākļos. Asinis parasti tiek ņemtas no rokas vai rokas vēnas. Uz rokas tiek uzlikts žņaugs, lai uzpūstu vēnu un atvieglotu procedūru, kā arī tiek notīrīta āda vietā, kur tiks ievietota adata. Kad adata ieduras, var būt jūtams neliels dūriens, un asinis tiks savāktas sterilā mēģenē.

Pēc asins parauga ņemšanas tas tiek pārvietots uz laboratoriju, kur laboratorijas tehniķis veiks pārējo ELISA procedūru. Asins paraugu vispirms pievieno ELISA plāksnes iedobēm. Ja specifiskā antiviela ir klāt, tā saistās ar antigēnu. Pēc tam plāksni mazgā, izmantojot buferšķīdumu, lai noņemtu nesaistītās antivielas.

Pēc tam pievieno otru, parasti dzīvnieku izcelsmes antivielu, kurai ir pievienots enzīms, kas saistās ar antivielas-antigēna kompleksu. Plāksni atkal mazgā, lai noņemtu lieko. Enzīms reaģē uz krāsu, ja ELISA procedūras beigās pievieno substrātu. Rezultātu dod krāsas maiņas pakāpes mērīšana.

ELISA procedūra ir rūpīgi jāievēro, lai izvairītos no nepatiesiem rezultātiem. Lielākajā daļā ELISA plākšņu ir iekļauta pozitīva un negatīva kontrole, lai samazinātu šādus viltus rezultātus. Veicot HIV testu, pozitīvam rezultātam parasti seko otrs apstiprinošs tests, bieži vien cita veida tests, piemēram, Western Blot.