Fluoresceīna izotiocianāta konjugētā (FITC) antiviela ir fluorescējošs molekulārais marķieris, kas ir ļoti specifisks vai nu konkrētam proteīnam, vai primārai antivielai. Tos izmanto, lai identificētu olbaltumvielas imūncitoķīmijā, enzīmu un olbaltumvielu aktivitātes pārbaudēs, plūsmas citometrijā un Western blotēšana. Lielāko daļu FITC antivielu var iegādāties specializētos molekulārās bioloģijas uzņēmumos vai izgatavot atsevišķās pētniecības laboratorijās.
FITC ir fluorohroms, kas bieži ir konjugēts vai saistīts ar antivielu, lai izveidotu specifisku, fluorescējošu marķieri. Ja fluorohromi tiek pakļauti elektromagnētiskai enerģijai noteiktā viļņa garumā, tie ir ķīmiskas vielas, kas absorbēs enerģiju un izstaro fotonu noteiktā viļņa garumā. FITC absorbē enerģiju pie 495 nm un izstaro fotonu pie 521 nm. Katram fluorhromam ir atšķirīgs absorbcijas un emisijas diapazons, kas ļauj sistemātiski noteikt daudzas ar fluorhromu saistītas antivielas vienā audu gabalā vai paraugā. Tas ir līdzīgi tam, kā marķēt dažādas šūnas daļas ar dažādām krāsām un pēc tam izmantot specializētas brilles, lai vienlaikus aplūkotu tikai vienu krāsu.
Antivielas var būt saistītas vai konjugētas ar FITC molekulu, lai iegūtu FITC antivielu. Šo FITC antivielu var izmantot, lai tieši vai netieši marķētu proteīnu. Ja FITC antiviela tieši marķē proteīnu, tā darbojas kā primārā antiviela vai antiviela, kas ir tiešā saskarē ar antigēnu. FITC antivielu netieša izmantošana notiek, ja to izmanto kā sekundāru antivielu, kas specifiski saistās ar primāro antivielu. Ja FITC konjugētu antivielu izmanto tieši, marķēšanas procedūra aizņem mazāk laika, taču marķēšana nav tik spēcīga. Netiešā marķēšana veic papildu darbību, taču signāls vai etiķete tiek pastiprināta, jo vairākas ar FITC iezīmētas sekundārās antivielas var pievienoties vienai primārajai antivielai.
Šūnu un molekulārajā bioloģijā FITC antivielu var izmantot daudzos veidos. Šāda veida antivielas var izmantot atsevišķi vai kombinācijā ar citām monoklonālām vai poliklonālām antivielām, lai marķētu specifiskus proteīnus šūnās, izmantojot metodi, kas pazīstama kā imūncitoķīmija. FITC antivielas var izmantot arī tādās metodēs kā enzīmu un olbaltumvielu aktivitātes testi, plūsmas citometrija un Western blotēšana.
FITC konjugētās primārās un sekundārās antivielas ir plaši pieejamas daudzos molekulārās bioloģijas uzņēmumos. Laboratorijas var arī sagatavot savas primārās antivielas un pēc tam izmantot komplektu, lai ar tām konjugētu FITC. Daži uzņēmumi ņems laboratorijā sagatavotas primārās antivielas un konjugēs tās ar FITC fluorohromu laboratorijai. FITC konjugētās sekundārās antivielas parasti neizgatavo atsevišķas pētniecības laboratorijas, un tās parasti iegādājas no uzņēmumiem, kas specializējas sekundāro antivielu ražošanā.