Kas ir PCR jutība?

Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) ir metode, ko izmanto DNS parauga pastiprināšanai. PCR jutība attiecas uz to, cik efektīvi paraugs tiek pastiprināts. Jutīgums ir gan svētība, gan lāsts cilvēkiem, kuri izmanto šo paņēmienu, lai sagatavotu DNS analīzei. PCR jutīgumu var ietekmēt vairākas lietas, un pētnieki ir veikuši virkni pētījumu, lai uzzinātu par lietām, kurām var būt nozīme jutīgumā, un kā šīs lietas var ietekmēt testa rezultātu.

Vienkārši sakot, PCR procedūrā DNS paraugs pamatā tiek atslēgts, lai izveidotu divus pavedienus, un pēc tam tiek mudināts replicēties, radot vairākas DNS virknes kopijas. Šī metode izmanto DNS replikācijas veidu reālajā pasaulē, lai izveidotu lielu paraugu, ko var izmantot analīzei. Izmantojot PCR, cilvēki var pastiprināt nelielu paraugu, lai apskatītu konkrētu interešu jomu un noteiktu konkrētus DNS segmentus, kas var radīt interesi vai bažas.

Šī procesa ārkārtējā jutība nozīmē, ka PCR ir ļoti neaizsargāta pret piesārņojumu. Ja persona, kas veic testu, piesārņo paraugu ar DNS no sava ķermeņa, piemēram, mājdzīvnieka matiem vai ādas pārslu, paraugs būs šķībs. PCR jutība ir liela problēma laboratorijās, jo cilvēki, ja iespējams, vēlas izvairīties no piesārņotiem paraugiem.

Tomēr PCR jutība ir arī svētība. Spēja pastiprināt visu un jebko paraugā nozīmē, ka PCR var izmantot, lai atrastu DNS, kas paraugā var būt tikai nelielā daudzumā. Piemēram, kādam ar hronisku slimību, piemēram, HIV, vīrusa daudzums var būt ļoti zems, tāpēc pacienta asinīs ir grūti atrast vīrusa kopijas. Pateicoties PCR jutībai, ir nosakāmas pat ļoti zemas vīrusu slodzes, jo viena vīrusa kopija tiks pastiprināta, kad tā tiek palaists caur PCR.

Kriminālistikas PCR analīzē PCR jutīgums var būt kritisks, jo tas var ļaut tehniķim paraugā identificēt svešu DNS, kas varētu norādīt uz noziegumu. Seno DNS paraugu analīzi var arī sarežģīt vai atvieglot jutīgums. Iespēja pastiprināt niecīgu DNS paraugu var būt svētība, ja ir pieejams tikai ierobežots paraugs, piemēram, ja tiesu medicīnas antropologam ir tikai viens zobs, ar kuru jāstrādā, identificējot kādu, bet tas nozīmē arī to, ka ierobežots paraugs var tikt apdraudēts ne tikai. lietot piesārņojuma dēļ.

Daudzas lietas var ietekmēt PCR jutību. Precīzs laboratorijā izmantotais process ir faktors, tāpat kā parauga apstrādei izmantotie savienojumi. Tāpēc tehniķiem ir rūpīgi jādokumentē process, lai kāds, kurš pēta rezultātus, varētu meklēt problemātiskas metodes vai izmantotās ķīmiskās vielas, kas var padarīt rezultātus nederīgus vai apšaubīt tos.