Kas ir antivielu konjugāts?

Antivielu konjugāts ir marķēšanas molekula, ko var izmantot histoloģiskajos vai fermentatīvās antigēna noteikšanas testos, lai lokalizētu saistītās antivielas. Tas darbojas, fiziski pievienojoties vai konjugējoties ar antivielu, ko izmanto, lai atzīmētu interesējošo antigēnu. Antiviela, kas ir marķēta ar antivielu konjugātu, ir rīks, ko bieži izmanto pētījumos, lai noteiktu interesējošo proteīnu vai antigēnu precīzu atrašanās vietu vai daudzumu, pret kuriem antiviela vai antivielas tika radītas.

Histoloģiskie un proteomiskie testi bieži paļaujas uz antivielām kā reaģentu pētniecības metodēs, ar kurām var marķēt specifiskus proteīnus. Pakļaujot interesējošo antigēnu vai proteīnu pret to radītai antivielai, var marķēt antigēnus vai proteīnus. Izmantojot antivielu konjugātu, tas ir, antivielu, kas ir konjugēta ar molekulu, kas ir īpaši izmantota vai sintezēta, lai to varētu viegli noteikt, pēc tam var identificēt un pārbaudīt antivielas uz to attiecīgajiem antigēniem. Visizplatītākais antivielu konjugāta veids ir fluorescējoša molekula, kas ļauj identificēt antigēnus audos fluorescējošā mikroskopā. Citi konjugāti ietver tādas molekulas kā mārrutku peroksidāze, ko izmanto konjugācijā ar antivielām vēlākai attīstībai ar diaminobenzidīnu (DAB).

Bieži vien primārās antivielas tiek radītas pret specifiskiem antigēniem, savukārt sekundārās antivielas tiks konjugētas ar marķēšanas molekulām un attīstīsies pret primāro antivielu. Piemēram, kāds varētu būt ieinteresēts identificēt antigēnu, ko sauc par antigēnu X. Pēc tam varētu izmantot, piemēram, pelē izaudzētu antivielu, kas reaģē un pielīp pie antigēna X. Lai varētu atrast, kur šīs primārās peles antivielas ir atradušās. un piesaistīta šīm antigēna X molekulām, tad tiktu izmantota sekundārā antiviela, piemēram, tāda, kas audzēta kazā, kas būtu marķēta ar konjugātu, kas padara šo sekundāro antivielu nosakāmu fermentatīvās vai fluorescējošās mikroskopiskās analīzēs. Antigēnu lokalizācijas testos, izmantojot elektronu mikroskopu, zelta daļiņas bieži izmanto kā antivielu konjugātu, jo tās var noteikt, izmantojot elektronu staru.

Primāro un sekundāro antivielu izmantošanas iemesls, nevis antivielu konjugācijas izmantošana, kurā primārā antiviela ir tieši konjugēta, ir izmaksu efektivitāte. Antivielu konjugācija ir dārga laika un reaģentu ziņā. Īpaši neparastiem antigēniem antivielu konjugācija uz primārajām antivielām nav ražošanas izdevumu vērta. Drīzāk, izmantojot antivielu konjugāciju uz sekundārajām antivielām, lielu daudzumu konjugētu antivielu var sintezēt uzreiz un izmantot testos ar virkni primāro antivielu, kas pielāgotas daudzu dažādu antigēnu lokalizācijai, padarot ražošanas procesu vērtīgu un rentablu.

Tomēr dažos gadījumos primārā antiviela tiks marķēta, lai samazinātu troksni noteikšanas signālā sakarā ar pastiprinātu nespecifisku antivielu saistīšanos, kas rodas, izmantojot vairākas antivielas. Lai gan šīm dārgajām, ļoti jutīgajām pārbaudēm joprojām būs nepieciešama šī metode. Ir iespējams iegādāties komplektus, kas ļauj pētniekam marķēt konjugātus ar savām izvēlētajām antivielām, palielinot reaģenta izmaksas, bet samazinot protokola soļus un, iespējams, palielinot signāla un trokšņa attiecību galīgajā antivielu noteikšanas testā.